此方法适用于小量质粒DNA的提取，提取的质粒DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分析。方法如下：
1、接1%含质粒的大肠杆菌细胞于2ml LB培养基
2、37℃振荡培养箱过夜
3、取1.5ml菌体于Ep管，以4000rpm离心3min，弃上清液
4、加0.lml溶液I(1％葡萄糖，50mM/L EDTA pH8.0，25mM/L Tris-HCl pH8.0)充分混合
5、加入0.2ml溶液 II(0.2 mM/L NaOH，1％ SDS)，轻轻翻转混匀，置于冰浴5 min 
6、加入0.15ml预冷溶液III(5 mol/L KAc，pH4.8)，轻轻翻转混匀，置于冰浴5 min 
7、以10,000rpm离心20min，取上清液于另一新Ep管
8、加入等体积的异戊醇，混匀后于0℃静置10min
9、再以10,000rpm离心20min，弃上清
10、用70％乙醇0.5ml洗涤一次，抽干所有液体
11、待沉淀干燥后，溶于0.05mlTE缓冲液中