細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),使用的二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)通常采用兩種方式控制箱體內(nèi)濕度。一是采用被動(dòng)控濕法,即通常的二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)均放置一個(gè)3L的水盤,內(nèi)盛3L無菌純水,依靠水的自然蒸發(fā),使箱體內(nèi)濕度達(dá)到95%。二是一些高級(jí)的二氧化碳培養(yǎng)箱,采用主動(dòng)加濕系統(tǒng)(蒸汽發(fā)生器,加熱水盤,噴霧器等),可以控制箱體內(nèi)的濕度。
然而在這種高濕度條件下,放置在二氧化碳培養(yǎng)箱箱體內(nèi)部的水盤中的純凈水,很容易造成微生物的滋生,產(chǎn)生污染,導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)*失敗。
目前,控制水盤內(nèi)污染的方法有如下幾種:
1、定期(至少每?jī)芍芤淮危鼡Q水盤內(nèi)的無菌蒸餾水或無菌去離子水。
2、在水盤內(nèi)添加適量硫酸銅,配制方法:20g無水硫酸銅+5ml濃硫酸+1L滅菌純水。
3、夏季氣溫高時(shí),水盤里加0.02%的疊氮鈉可以有效的預(yù)防真菌污染。
4、水盤內(nèi)添加適量抗生素。
5、定期為二氧化碳培養(yǎng)箱(含水盤)進(jìn)行一次高溫滅菌。
6、使用專用的水盤污染控制試劑,如市面上有些CO2培養(yǎng)箱廠家提供水盤污染控制專用的銀離子消毒盒,說明書上描述能有效殺滅600中微生物,能持續(xù)使用6個(gè)月,但此類專用污染控制試劑較常規(guī)方法,存在價(jià)格較昂貴缺點(diǎn)。
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