根據臨床初步診斷及待檢細菌的種類,可選用不同環境條件進行培養。常用的有需氧培養法、二氧化碳培養法和厭氧培養法。為了提高檢驗的正確率,同一標本常同時采用兩種或三種不同的培養法。
需氧培養法 本法是臨床細菌室常用的培養方法,適于一般需氧和兼性厭氧菌的培養。將已接種好的平板、斜面和液體培養基等,置于35℃溫箱中孵育18~24h,一般細菌可于培養基上生長,但有些難以生長的細菌需培養更長的時間才能生長。另外,有的細菌適生長溫度是28℃~30℃,如鼠疫耶爾森菌,甚至在4℃也能生長,如李斯特菌。
二氧化碳培養法 有些細菌初次分離培養時須置5%~l0%C02環境才能生長良好,如腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌,牛布魯菌等。常以下列方法供給C02。
1.二氧化碳培養箱:是一臺特制的培養箱,既能調節C02的含量,又能調節所需的溫度。C02從鋼瓶通過培養箱的C02,運送管進入培養箱內,調節好所需C02,濃度自動控制器后,將接種好的培養基直接放入培養箱中培養即可。此法適于大型實驗室應用。
2.燭缸法:將已接種好的培養基置干燥器內,并放入點燃的蠟燭。干燥器蓋的邊緣涂上凡士林,蓋上蓋子,燭光經幾分鐘后自行熄滅,此時干燥器內C02含量約占5%~l0%,然后將干燥器放入35℃溫箱內培養。培養時間一般為18~24h,少數菌種需培養3~7天或更長。
3.化學法:按每升容積加入碳酸氫鈉0.49和濃鹽酸0.35ml的比例,分別置于容器內。將容器連同接種好的培養基都放人干燥器內,蓋緊干燥器的蓋子,傾斜容器使濃鹽酸與碳酸氫鈉接觸生成C02。
厭氧培養法 適用于專性厭氧菌和兼性厭氧菌的培養。常用的厭氧培養法有:
①皰肉培養基法;②焦性沒食子酸法;③厭氧罐法;④氣袋法;⑤厭氧培養箱法。
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