喆图小编给大家讲讲有机废水中一种MAX常见的氯酚类物质,主要来源于造纸、印染、纺织等行业废水。由于TCP的水溶解性较大,且土壤等固体物质对其吸附和固定作用较弱,常以水为载体广泛存在。
首先给大家介绍一下处理实验所需试剂与仪器
试剂:氨水,乙醇(纯度>90%),浓盐酸,稀盐酸,三氯酚(TCP,氨基安替比林,铁氰吪钾,NaCl,缓冲溶液。
主要仪器:液相色谱仪,电子天平,紫外可见分光光度计,鼓风干燥箱,液晶显示生化培养箱,恒温振荡器,单人水平垂直两用净化工作台,高压蒸汽灭菌器,高速冷冻离心机。
接着是实验所需的材料与方法:菌种与培养基
菌种:从膨润土中分离得到的一种镰刀菌,确定为层出镰刀菌,属于镰刀菌属。用培养温度为30℃液晶显示生化培养箱。
固体培养基:KH2PO41.0g,MgSO4·7H2O0.5g,蛋白胨5g,葡萄糖10g,琼脂15~20g,蒸馏水500mL。灭菌后加入相应浓度的TCP摇匀,在无菌操作台上倒平板,待平板冷却凝固后进行接种,MAX后于液晶显示生化培养箱中30℃倒置培养。
液体培养基:CaCl20.1g,KH2PO40.5g,NaCl0.2g,H2O1000mL,微量元素(FeSO4·7H2O3.82g,CoCl2·6H2O0.25g,H3BO36mg,CuSO4·5H2O2.9mg等)1mL。所有培养基均在121℃的鼓风干燥箱中灭菌30min。
孢子悬浊液:在驯化好且长有丰富的白色分生孢子的蛋白胨琼脂培养基中刮取部分孢子置于无机盐固体培养基上,于30℃液晶显示生化培养箱中恒温培养。7d后转接于150mg·L-1TCP的无机盐固体培养基驯化3次,待菌体大量长出后于无菌条件下刮取孢子至无菌蒸馏水中,于恒温振荡器中振荡分散成乳白色的孢子悬液,光密度约为0.1(OD400),孢子个数为3.1×106个·mL-1。
取0.05g过滤出的菌体的菌体孢子悬浊液(600nm处吸光度为0.16~0.165),加入50mL液体培养基浓度一定的TCP溶液中,在一定温度、pH、150r·min-1下继续培养,每间隔24h测定TCP浓度,分别研究温度、pH、外加碳源、氮源、氯离子及TCP初始浓度对其降解效率的影响。
温度影响实验条件为pH7.0,TCP初始浓度为30mg·L-1,温度25℃、30℃和35℃。
pH影响实验条件为30℃,TCP初始浓度为30mg·L-1,pH为2.0~8.0。
外加碳源影响实验条件为30℃、pH7.0,TCP初始浓度为30mg·L-1,葡萄糖(1g·L-1.3g·L-1.5g·L-1)。氮源影响实验条件为30℃、pH7.0,TCP初始浓度为30mg·L-1,氮源物质为NH4Cl、NaNO2、蛋白胨、NH4NO3和NaNO3(浓度均为0.2g·L-1)。
氯离子影响实验条件为30℃、pH7.0,TCP初始浓度为30mg·L-1,NaCl浓度为0~0.6g·L-1。
TCP浓度影响实验条件为30℃、pH7.0,TCP初始浓度为10~50mg·L-1。平行试验3次,取其平均值。
以上内容仅供参考,如需了解液晶显示生化培养箱详情详情,请联系喆图客服!
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