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电热恒温培养箱、恒温水浴锅、振荡水浴摇床、压力蒸汽消毒器、干热烤箱、低温冰箱（－80℃）或液氮生物容器、普通冰箱、天平(精密度0.1g和0.0001g)、混匀振荡器、匀浆器、菌落计数器、低温高速离心机，玻璃器皿、生物安全柜等。
培养基和试剂
0.5mmol/L组氨酸－0.5mmol/L色氨酸－0.5mmol/L生物素溶液
成分： | L-组氨酸（MW155） | 78mg |
| D-生物素（MW244） | 122mg |
| L-色氨酸（MW204） | 102mg |
| 加蒸馏水/去离子水至 | 1000mL |
配制：将上述成分加热，以溶解生物素，然后在0.068MPa下高压灭菌20min。贮于4℃冰箱。若试验中不使用大肠杆菌，则不添加色氨酸。
顶层琼脂培养基
成分： | 琼脂粉 | 1.2g |
| 氯化钠 | 1.0g |
| 加蒸馏水/去离子水至 | 200mL |
配制：上述成分混合后，于0.103MPa下高压灭菌30min。实验时，加入0.5mmol/L组氨酸－0.5mmol/L色氨酸－0.5mmol/L生物素溶液20mL。若试验中不使用大肠杆菌，则不添加色氨酸。
Vogel-Bonner(V-B)培养基E
成分： | 枸橼酸(C6H8O7·H2O) | 100g |
| 磷酸氢二钾(K2HPO4) | 500g |
| 磷酸氢铵钠(NaNH4HPO4·4H2O) | 175g |
| 硫酸镁(MgSO4·7H2O) | 10g |
| 加蒸馏水/去离子水至 | 1000mL |
配制：先将前三种成分加热溶解后，再将溶解的硫酸镁缓缓倒入容量瓶中，加蒸馏水/去离子水至1000mL。于0.103MPa下高压灭菌30min。储于4℃冰箱。
20%葡萄糖溶液
成分： | 葡萄糖 | 200g |
| 加蒸馏水/去离子水至 | 1000mL |
配制：加少量蒸馏水/去离子水加温溶解葡萄糖，再加蒸馏水/去离子水至1000mL。于0.068MPa下高压灭菌20min。储于4℃冰箱。
底层琼脂培养基
成分： | 琼脂粉 | 7.5g |
| 蒸馏水/去离子水 | 480mL |
| V-B培养基E | 10mL |
| 20%葡萄糖溶液 | 10mL |
配制：首先将前两种成分于0.103MPa下高压灭菌30min后，再加入后两种成分，充分混匀倒底层平板。按每皿25mL制备平板，冷凝固化后倒置于电热恒温培养箱中24h，备用。
营养肉汤培养基
成分： | :C8H9Cl | 2.5g |
| 胰胨 | 5.0g |
| 磷酸氢二钾(K2HPO4) | 1.0g |
| 加蒸馏水/去离子水至 | 500mL |
配制：将上述成分混合后，于0.103MPa下高压灭菌30min。储于4℃冰箱。
盐溶液(1.65mol/L KCl+0.4mol/L MgCl2)
成分： | (KCl) | 61.5g |
KCl | 氯化镁(MgCl2·6H2O) | 40.7g |
| 加蒸馏水/去离子水至 | 500mL |
配制：在水中溶解上述成分后，于0.103MPa下高压灭菌30min。储于4℃冰箱。
0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4)
成分： | 磷酸二氢钠(NaH2PO4·2H2O) | 2.965g |
| 磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O) | 29.015g |
| 加蒸馏水/去离子水至 | 500mL |
配制：溶解上述成分后，于0.103MPa下高压灭菌30min。储于4℃冰箱。
S9混合液
成分： | 每毫升S9混合液 | |
| 肝S9 | 100μl |
| 盐溶液 | 20μl |
| 灭菌蒸馏水/去离子水 | 380μl |
| 0.2mol/L磷酸盐缓冲液 | 500μl |
| 辅酶II(NADP) | 4μmol |
| 6-磷酸葡萄糖(G-6-P) | 5μmol |
配制：将辅酶II和6-磷酸葡萄糖置于灭菌三角瓶内称重，然后按上述相反的次序加入各种成分，使肝S9加到已有缓冲液的溶液中。该混合液必须临用现配，并保存于冰水浴中。实验结束，剩余S9混合液应该丢弃。
菌株鉴定用和特殊用途试剂
组氨酸-色氨酸-生物素平板
成分： | 琼脂粉 | 15g |
| 蒸馏水/去离子水 | 934mL |
| (V-B)培养基E | 20mL |
| 20%葡萄糖 | 20mL |
| 灭菌盐酸组氨酸水溶液(0.5g/100mL) | 10mL |
| 灭菌盐酸色氨酸水溶液(0.5g/100mL) | 10mL |
| 灭菌0.5mmol/L生物素溶液 | 6mL |
配制：高压灭菌琼脂和水后，将灭菌20%葡萄糖，V-B培养基、组氨酸溶液，加进热的琼脂溶液中（若试验中不使用大肠杆菌，则不添加色氨酸，同时蒸馏水/去离子水改为944mL）。待溶液稍微冷却后，加入灭菌生物素，混匀，浇制平板。
氨苄青霉素平板和氨苄青霉素/四环素平板
成分： | 琼脂粉 | 15g |
| 蒸馏水/去离子水 | 930mL |
| (V-B)盐溶液 | 20mL |
| 20%葡萄糖 | 20mL |
| 灭菌盐酸组氨酸溶液（0.5g/100mL） | 10mL |
| 灭菌盐酸色氨酸水溶液(0.5g/100mL) | 10mL |
| 灭菌0.5mmol/L生物素溶液 | 6mL |
| 氨苄青霉素溶液(8mg/mL于0.02mol/L NaOH中) | 3.15mL |
| 四环素溶液(8mg/mL于0.02mol/L HCl中) | 0.25mL |
配制：琼脂和水高压灭菌20min，将无菌的葡萄糖、VB盐溶液、组氨酸溶液和色氨酸溶液，加进热的琼脂溶液中，混匀（若试验中不使用大肠杆菌，则不添加色氨酸，同时蒸馏水/去离子水改为加940mL）。冷却至大约50℃，无菌条件下加入四环素溶液和/或氨苄青霉素溶液。
应该在倾注琼脂平板后几天内，制备主平板。
营养琼脂平板
成分： | 琼脂粉 | 7.5g |
| 营养肉汤培养基 | 500mL |
配制：于0.103MPa下高压灭菌30min后倾注平板。
试验菌株及其生物学特性鉴定
试验菌株
采用以下菌株作为标准组合：
鼠伤寒沙门氏菌TA1535；
鼠伤寒沙门氏菌TA97或TA97a或TA1537；
鼠伤寒沙门氏菌TA98；
鼠伤寒沙门氏菌TA100；
鼠伤寒沙门氏菌TA102或大肠杆菌WP2uvrA或大肠杆菌WP2uvrA（pKM101）；
生物学特性鉴定
新获得的或长期保存的菌种，在试验前必须进行菌株的生物特性鉴定。
以上内容仅供参考！
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