接下来喆图小编就来给大家讲讲关于冻存的细胞如何做前处理及培养。
首先当我们收到包装箱后,立即将冻存细胞从干冰移入液氮中冻存。此过程尽量快,以避免升温。不要将细胞储存在-60℃的低温冰箱中,这样会对细胞造成不可挽回的伤害。
接下来是培养细胞的关键:
(1) 将一管细胞从液氮罐中取出,注意保护手和眼睛。
(2) 将冻存管快速的放入37℃的电热恒温水浴锅中,轻轻握住并旋转,直到管内物体*融化。
(3) 将冻存管立即从电热恒温水浴锅中拿出,擦干,转入无菌环境。
(4) 用70%的酒精冲洗冻存管,然后擦去多余酒精。
(5) 打开盖子,注意手指不要碰到里面的螺纹(注意,由于冻存管有负压,开盖时可能会有少量溢出,这是正常现象)。
(6) 用多聚赖氨酸包被培养瓶。多数细胞推荐的接种密度为每平方厘米6000个细胞。
(7) 盖好培养瓶的盖子,轻轻摇晃培养瓶以使细胞分布均匀。若需要气体交换可打开盖子。
(8) 将培养瓶放入CO2培养箱中37℃恒温培养。
(9) 放入CO2培养箱后第6-16小时更换一次培养基,以去除残留的二甲基亚枫和未贴壁的细胞。
以上内容仅供参考,一些细胞类型像神经细胞,神经胶质细胞和一些生长缓慢的上皮细胞,不推荐扩增培养和再次冻存。其它的细胞类型像成纤维细胞、星形细胞、肾系膜细胞、星形胶质细胞等等,可以扩增培养和再次冻存,如需了解详情请联系喆图客服!
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