細胞培養時,使用的CO2培養箱內通常采用兩種方式控制箱體內濕度。一是采用被動控濕法,即通常的CO2培養箱內均放置一個3L的水盤,內盛3L無菌純水,依靠水的自然蒸發,使箱體內濕度達到95%。二是一些的CO2培養箱,采用主動加濕系統(蒸汽發生器,加熱水盤,噴霧器等),可以控制箱體內的濕度。
然而在這種高濕度條件下,放置在箱體內部的水盤中的純凈水,很容易造成微生物的滋生,產生污染,導致細胞培養*失敗。
目前,控制水盤內污染的方法有如下幾種:
1、 定期(至少每兩周一次),更換水盤內的無菌蒸餾水或無菌去離子水。
2、 在水盤內添加適量硫酸銅,配制方法:20g無水硫酸銅+5ml濃硫酸+1L滅菌純水。
3、 夏季氣溫高時,水盤里加0.02%的疊氮鈉可以有效的預防真菌污染。
4、 水盤內添加適量抗生素。
5、 定期為培養箱(含水盤)進行一次高溫滅菌。
6、 使用的水盤污染控制試劑,如市面上有些CO2培養箱廠家提供水盤污染控制的銀離子消毒盒,說明書上描述能有效殺滅600中微生物,能持續使用6個月,但此類污染控制試劑較常規方法,存在價格較昂貴缺點。
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